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蔗糖的測定原理

發布時間:2013-11-25

蔗糖的測定


蔗糖是葡萄糖和果糖組成的雙糖,沒有還原性,不能用堿性銅鹽試劑直接測定,但在一定條件下,蔗糖可水解為具有還原性的葡萄糖和果糖。因此,可以用測定還原糖的方法測定蔗糖含量。


這里介紹還原糖法。


1.原理


樣品脫脂后,用水或乙醇提取,提取液經澄清處理以除去蛋白質等雜質,再用鹽酸進行水解,使蔗糖轉化為還原糖。然后按還原糖測定方法分別測定水解前后樣品液中還原糖含量,兩者差值即為由蔗糖水解產生的還原糖量,乘以一個換算系數即為蔗糖含量。


2.儀器


①25mL古氏坩堝或G4垂融坩堝。


②真空泵。


③滴定管。


④水浴鍋。


3.試劑


①6mol·L-1鹽酸溶液。


②5mol·L-1氫氧化鈉溶液:稱取20g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至100mL。


③lmol·L-1氫氧化鈉溶液:稱取4g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至100mL。


④費林試劑甲液:稱取34.639g硫酸銅(CuSO4·5H2O),加適量水溶解,加人0.5mL硫酸,加水稀釋至500mL,用精制石棉過濾。


⑤費林試劑乙液;稱取173g酒石酸鉀鈉和50g氫氧化鈉,加適量水溶解并稀釋到500mL,用精制石棉過濾,貯存于橡皮塞玻璃瓶中。


⑥精制石棉:取石棉先用3 mol·L-1鹽酸浸泡2~3h,用水洗凈,再用10%氫氧化鈉浸泡2~3h。傾去溶液,再用堿性酒石酸銅乙液浸泡數小時,用水洗凈,再以3 mol·L-1鹽酸浸泡數小時,用水洗至不呈酸性。加水振蕩,使之成為微細的漿狀軟纖維,用水浸泡并貯存于玻璃瓶中,即可用于填充古氏坩堝。


⑦0.02mol·L-1高錳酸鉀標準溶液:稱取3.3g高錳酸鉀溶于1050mL水中,緩緩煮沸


20~30min,冷卻后于暗處密閉保存數日,用垂融漏斗過濾,保存于棕色瓶中。


標定:精確稱取150~200℃干燥1~1.5h的基準草酸鈉約0.2g,溶于50mL水中;加80mL硫酸,用配制的高錳酸鉀溶液滴定,接近終點時加熱至70℃,繼續滴至溶液呈粉紅色30s不褪為止。同時作空白試驗。


計算:


c=[﹙m×1000﹚÷134﹙V-V0﹚] ×﹙2/5﹚


式中:c——高錳酸鉀標準溶液的濃度,mol·L-1;


m——草酸鈉質量,g;


V——標定時消耗高錳酸鉀溶液體積,mL;


V0——空白消禍高錳酸鉀溶液體積,mL;


134——草酸鈉的摩爾質量,g·moL-1。


⑧硫酸鐵溶液:稱取50g硫酸鐵,加人200mL水溶解后加入100mL硫酸,冷卻后加水稀釋至1000mL。


⑨3mol·L-1鹽酸溶液:量取30mL濃鹽酸,加水稀釋至120mL。


⑩甲基紅乙醇溶液(0.1%):稱取0.1g甲基紅,用60%乙醇溶解并定容到100mL。


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